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全光譜流式細(xì)胞儀儀器優(yōu)缺點(diǎn)分析

更新時(shí)間:2024-03-07      點(diǎn)擊次數(shù):2773
  全光譜流式細(xì)胞儀是一種先進(jìn)的流式細(xì)胞分析技術(shù),它相較于傳統(tǒng)流式細(xì)胞儀具有一些顯著的優(yōu)勢(shì),但也存在一些局限性。
  以下是全光譜流式細(xì)胞儀的優(yōu)缺點(diǎn):
  一、優(yōu)點(diǎn):
  1.更多的檢測(cè)通道:光譜流式細(xì)胞儀可以提供多達(dá)38個(gè)或更多的熒光檢測(cè)通道,這遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)了傳統(tǒng)流式細(xì)胞儀的通道數(shù)。
  2.光譜靈活性:由于能夠檢測(cè)400-900nm全范圍光譜,這種儀器可以檢測(cè)任何能被配置激光器激發(fā)的熒光染料,無(wú)需更換濾光片,提供了無(wú)限的靈活性。
  3.高光譜分辨率:光譜流式細(xì)胞儀能夠解析和補(bǔ)償調(diào)節(jié)分離高度重疊的熒光團(tuán),即使在光譜重疊度很高的兩種熒光染料也可以同時(shí)使用。
  4.擴(kuò)展性強(qiáng):可以通過(guò)增加激光器數(shù)量來(lái)進(jìn)一步擴(kuò)展檢測(cè)通道,例如,配備5根激光器可以實(shí)現(xiàn)64個(gè)熒光檢測(cè)通道。
  二、缺點(diǎn):
  1.成本較高:由于其復(fù)雜的光學(xué)系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理需求,光譜流式細(xì)胞儀的成本通常高于傳統(tǒng)流式細(xì)胞儀。
  2.操作復(fù)雜:相比于傳統(tǒng)流式細(xì)胞儀,光譜流式細(xì)胞儀的操作和維護(hù)可能更為復(fù)雜,需要專(zhuān)業(yè)的技術(shù)人員進(jìn)行操作和管理。
  3.數(shù)據(jù)分析難度:由于數(shù)據(jù)量的大幅增加,流式細(xì)胞儀產(chǎn)生的數(shù)據(jù)分析和解釋可能需要更高級(jí)的計(jì)算工具和專(zhuān)業(yè)知識(shí)。
  全光譜流式細(xì)胞儀與傳統(tǒng)流式之間的區(qū)別:
  傳統(tǒng)流式和光譜流式之間的第一個(gè)重要區(qū)別是色散。傳統(tǒng)流式是根據(jù)波長(zhǎng)來(lái)阻擋、反射或傳輸光子的,而光譜流式是根據(jù)波長(zhǎng)來(lái)色散光子的。最常見(jiàn)的色散光學(xué)元件是棱鏡和光柵。棱鏡是一種典型的色散光學(xué)元件,它根據(jù)波長(zhǎng)的不同來(lái)折射光線(xiàn)。棱鏡的通量通常很高(>90%),色散發(fā)生在寬波長(zhǎng)范圍內(nèi),但色散是非線(xiàn)性的,光譜分辨率隨著波長(zhǎng)的變化而變化,通常在可見(jiàn)光譜中變化幾納米。光柵在特定波長(zhǎng)下具有更高分辨率的線(xiàn)性色散,但高階衍射的存在會(huì)降低效率和通量,增加雜散光。體積相位全息光柵,在他們的最佳波長(zhǎng),也可以提高效率和分辨率,而且雜散光的強(qiáng)度較低。除了色散問(wèn)題,其他光學(xué)效應(yīng),如球面像差,也會(huì)影響性能。大多數(shù)商用攝譜儀的設(shè)計(jì)都是為了最小化這些問(wèn)題,以提供最大的光學(xué)性能。
  傳統(tǒng)流式和光譜流式的第二個(gè)主要區(qū)別是檢測(cè)器。棱鏡或光柵產(chǎn)生的連續(xù)光譜的測(cè)量需要一個(gè)線(xiàn)性陣列的檢測(cè)器。檢測(cè)陣列的密度和間距,以及色散光學(xué)的性能,共同決定分辨率。近年來(lái),檢測(cè)技術(shù)發(fā)展迅速,目前光流式的檢測(cè)器主要有CCD和多陽(yáng)極PMT。
 

全光譜流式細(xì)胞儀

 

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